10 × tampon de transfert Tris-Glycine

Ce produit est un concentré 10-fold composé de 200 mM de Tris, 1,92 M de glycine, sans méthanol ni éthanol anhydre. Avant utilisation, prélever 100 mL de ce produit, puis ajouter 600 mL d'eau désionisée ou distillée pour mélanger, puis continuer à ajouter 200 mL d'éthanol anhydre pour mélanger, et enfin reconstituer l'eau désionisée ou distillée pour fixer le volume à 1 L. Après mélange, on obtiendra 1x solution de transfert de Tris-Glycine de 20 mM de Tris, 192 mM de glycine, 20% d'éthanol anhydre, pH 8.2-8.6 à 25 degrés. Le tampon de transfert Tris-Glycine 10× convient au transfert humide ou semi-sec des expériences Western-Blot.

Expédier et conserver à température ambiante, valable 12 mois.

1. Pour les protéines conventionnelles de petit à moyen poids moléculaire (25-70 kDa), les conditions de transfert recommandées sont de 300 mA pendant environ 30 min.

2. Pour les protéines conventionnelles de haut poids moléculaire, le temps de transfert peut être prolongé selon les besoins, avec un temps de transfert recommandé de 300 mA pendant 45-60 min.

3. Pour les protéines de petit poids moléculaire inférieur à 20 kDa, il est recommandé d'utiliser une taille de pores plus petite de 0,22 μm de membrane PVDF avec 200 mA pendant 20-25 min ou 300 mA pendant 15-20 min. . La teneur en méthanol (qui peut être remplacé par de l'éthanol) peut également être augmentée jusqu'à 25 % pour favoriser la fixation des petites protéines moléculaires dans le gel.

4. Pour les protéines ayant un poids moléculaire particulièrement élevé, il est recommandé de prolonger le temps de transfert à 300 mA pendant 60-90 min ou plus, d'ajouter une quantité appropriée de SDS à la solution de transfert jusqu'au résultat final. concentration d'environ 0,5‰ pour améliorer la libération des protéines du gel. Dans le même temps, en raison du long temps de transfert, il convient de prêter attention à l'effet du module de refroidissement, un nouveau module de refroidissement peut être remplacé à mi-chemin si nécessaire.

1. Veuillez utiliser la solution de travail dès que possible après la préparation. Il est recommandé de diluer les réactifs avec de l'eau purifiée pour usage en laboratoire (G4701-500ML).

2. Ce produit peut présenter des précipitations cristallines en cas de basse température ambiante, c'est un phénomène normal, vous pouvez modérer le chauffage, l'agitation magnétique pour aider à se dissoudre, pour être complètement dissous avant dilution et utilisation.

3. La couleur normale de ce produit est incolore et transparente. S'il apparaît brun clair ou brun jaunâtre, il doit être jeté rapidement.

4. Pour votre sécurité et votre santé, veuillez porter des lunettes de sécurité, des gants ou des vêtements de protection.

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